熒光分光光度計檢測 食品中抗壞血酸的測定應(yīng)用案例
發(fā)布時間:
2025-06-12 14:39
F98熒光分光光度計檢測食品中維生素C的應(yīng)用研究
依據(jù)GB 5009.86-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中抗壞血酸的測定》第二法(熒光法)
1 引言
維生素C(抗壞血酸)是食品營養(yǎng)分析的核心指標(biāo)之一。傳統(tǒng)檢測方法(如滴定法、色譜法)存在操作復(fù)雜或成本高等問題。熒光分光光度法憑借高靈敏度、低樣品消耗和快速分析的優(yōu)勢,成為國標(biāo)推薦方法之一。上海棱光技術(shù)有限公司開發(fā)的F98熒光分光光度計,憑借超高信噪比(>350:1 P-P)和超寬光譜范圍(200–900 nm),可精準(zhǔn)捕捉維生素C衍生物的微弱熒光信號,滿足復(fù)雜基質(zhì)樣品的檢測需求。
2 實驗部分
2.1 儀器與試劑
儀器:上海棱光F98熒光分光光度計
核心配置:日本濱松150W氙燈光源(壽命2000小時) + R928紅敏光電倍增管
關(guān)鍵參數(shù):
性能指標(biāo) | 參數(shù)值 |
---|---|
波長準(zhǔn)確性 | ±0.4 nm |
信噪比(RMS) | >1500 |
最小樣品量 | 0.5 mL(10 mm比色皿) |
掃描速度 | 最高60,000 nm/min |
光譜帶寬 | 1–20 nm多級可調(diào) |
試劑:
維生素C標(biāo)準(zhǔn)品(L-抗壞血酸)、偏磷酸(HPO?,≥38%)、鄰苯二胺(OPDA)、活性炭、硼酸-醋酸鈉緩沖液(pH 4.0)
所有溶液需用一級水(GB/T 6682)配制,避光保存。
2.2 樣品前處理
參考GB 5009.86-2016第二法流程:
提取:
稱取均勻樣品(果蔬/乳粉)2.0 g,加入20 mL 2%偏磷酸溶液,勻漿后離心(4000 r/min,10 min),取上清液。
氧化與衍生化:
取1 mL上清液 + 0.5 g 活性炭,振蕩5 min(氧化還原型VC為脫氫抗壞血酸);
過濾后,濾液加2 mL 硼酸-醋酸鈉緩沖液 + 1 mL 0.2% OPDA溶液,避光反應(yīng)30 min生成熒光衍生物。
2.3 熒光檢測條件
激發(fā)波長:338 nm | 發(fā)射波長:430 nm
帶寬:激發(fā)/發(fā)射均為10 nm(平衡靈敏度與分辨率)
響應(yīng)時間:2 s | 增益:中檔(避免信號飽和)
附件:10 mm石英比色皿(樣品體積0.5 mL
3 結(jié)果與討論
3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限
線性范圍:0.5–2μg/mL(R2 > 0.999)
檢出限:當(dāng)樣品取樣量為10g時,L(+)-抗壞血酸總量的檢出限為0.044mg/100g,定量限為 0.7 mg/ 100g
濃度(μg/mL) | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | |
---|---|---|---|---|---|
熒光強度(a.u.) | 12.50 | 25.01 | 37.12 | 49.98 |
3.2 實際樣品分析
樣品類型:獼猴桃、奶粉、復(fù)配添加劑
加標(biāo)回收率:95.2%–103.6%(RSD < 2.5%,n = 6)
關(guān)鍵優(yōu)勢:F98的水平光束設(shè)計顯著提升低濃度樣品信噪比;內(nèi)置可編程光門避免光敏性樣品信號衰減。
4 結(jié)論
上海棱光F98熒光分光光度計結(jié)合GB 5009.86-2016熒光法,可高效完成食品中維生素C的檢測:
性能卓越:超高信噪比與快速掃描(三維圖譜1 min完成)支持高通量檢測;
操作簡易:0.5 mL微量樣品加自動光門,降低人工誤差;
結(jié)果可靠:回收率>95%,RSD < 2.5%,滿足食品安全監(jiān)管要求。
應(yīng)用建議:適用于質(zhì)檢機構(gòu)、食品企業(yè)及研究單位,特別適合復(fù)雜基質(zhì)中痕量維生素C的精準(zhǔn)分析
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